Все для часто сложные и хорошо оборудованные микроскопы не дают отличных изображений из-за неправильного использования источника света, что обычно приводит к неадекватному освещению образца. При оптимизировании освещение образца должно быть ярким, без бликов и равномерно распределено в поле зрения.
Существует множество источников света, доступных для освещения микроскопов, как для обычного наблюдения, так и для критической фотомикрографии. Наиболее распространенным источником света, из -за его низкой стоимости и длительного срока службы, является галогенскую лампу вольфрама 50 или 100 Вт, как показано в основании микроскопической диаграммы на рисунке 1, на которой также подробно описываются оптические пути в типичном современном передаваемом световом микроскопе. На этом рисунке лампа вольфрамого-хагогена излучает непрерывный спектр света, центрированного при 3200 К (при установке на напряжении лампы +9 вольт), который затем передается через коллектор и полевой линзу, прежде чем отражать конденсатор поджигания и в образца. Световые лучи формирования изображения фиксируются целевой целью микроскопа и передаются либо в окуры, либо направленные пучком в один из нескольких портов камеры. На протяжении всего оптического пути микроскопа освещение направляется и фокусируется через серию диафрагм и линз, когда он перемещается от источника, чтобы осветить образец, а затем в окуляры или прикрепление камеры. Выравнивание оптических компонентов микроскопа для оптимизации освещения в современных микроскопах осуществляется в соответствии с правилами освещения Келера. Более подробная информация о том, как передаваемые и отраженные световые микроскопы выровнены для Precalköhler illuminationare, обсуждаемых в наших разделах по настройке микроскопа, полученного световой светильностью. Оптические пути, показанные выше на рисунке 1, типичны для передаваемого светового микроскопа и включают в себя ряд линз, диафрагмы, зеркала и пучков для проживания света через микроскоп.
Вольфрамовые лампы относительно ярки с цветовым спектром, центрированным при 3200 К (при установке примерно на +9 вольт), но требуют фильтров преобразования цветов для повышения их цветовой температуры до эквивалентности летнего света. Другим популярным источником света является ксеноновая лампа от 75 до 150 Вт из -за его очень высокой яркости и длительного срока службы, относительно ровного выхода через визуальный спектр и цветовую температуру, которая приближается к эмульсам дневного света. Там, где требуется очень высокая интенсивность света, часто используются оловянные лампы. UployScencemicroscopy, особенно с целью критической фотомикрографии, 100 Вт или 200 Вт, часто используются ртутные горелки. В прежние годы можно было бы использовать лампы углеродной дуги или лампы циркония, но эти источники редко встречаются сегодня. Для получения дополнительной информации и подробного обсуждения широкого спектра ламп, доступных для освещения микроскопа, посетите наш раздел «Источники света» для микроскопии и фотомикрографии.
Выравнивание источника освещения с помощью оптических путей в отраженной световой микроскопии также вызывает первичную обеспокоенность, особенно в отношении металлографии, полупроводниковой проверки пластин и замечательного нового прогресса в флуоресцентной микроскопии. Отраженные световые микроскопы также освещаются различными источниками света (как обсуждалось выше) и могут быть отрегулированы для оптимальной производительности с использованием освещения Келера. Это обсуждается более подробно в нашем разделе о конфигурации Освещения Офулера для отраженной световой микроскопии. Пути освещения для отраженной световой микроскопии также являются темой нескольких интерактивных учебных пособий Java, включая то, что связано непосредственно ниже.
В своей превосходной книге «Фотография через микроскоп» Джон Деллиаргес, что от 80 до 90 процентов всех фотомикрофоров, представленных на соревнования, выставки и научные публикации, являются жертвами неправильно выровненной оптики, что приводит к плохому освещению выборки. Это одна из наиболее распространенных проблем с микроскопией и фотомикрографией в целом, и неожиданное изучение студенческих микроскопов во многих университетских лабораториях выявит изобилие плохо скорректированных конденсаторов и источников освещения. Мы подозреваем, что неверное выравнивание и регулировка как конденсатора подножия, так и полевой диафрагмы по всему диапазону целей в данном микроскопе являются самым большим источником ошибок в фотомикрографии.
Нельзя переоценена необходимость надлежащего освещения. Слишком часто микроскоп $ 25, 000 снижается до уровня усиления рук путем ненадлежащего освещения и выравнивания, что приводит к фотомикрограммам, которые превосходят те, которые взяты с помощью микроскопа за 2000 долл. США при оптимальных условиях иулера. В сопутствующих разделах этого праймера, посвященного теории освещения Келера и его реализации (оба Fortranstedandreflectedlight) мы обсуждаем критические аспекты конфигурации микроскопа и включили множество Interavactive
